伏马毒素B1检测试剂盒使用说明书（酶联免疫法）

ag尊龙凯时的伏马毒素B1检测试剂盒采用酶联免疫法，旨在检测由串珠镰刀菌产生的真菌毒素——伏马毒素B1（FB1）。作为28种衍生物中最常见的一种，FB1对动物和人类健康均构成威胁。研究显示，FB1可导致马的白脑软化症和猪的肺水肿综合症，同时与人类食道癌、肝癌及胃癌的发生相关。该试剂盒可有效检测玉米及其制品中的FB1污染。

1. 检测原理

该试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及相关试剂组成。通过将样本溶液中的伏马毒素B1与酶标板上预包被的偶联抗原竞争抗体，最终利用TMB底物显色，测定吸光度值，以此反推出样本中FB1的含量。

2. 技术指标

• 灵敏度：1 ppb (ng/ml)
• 反应模式：25℃，30分钟～15分钟
• 检测下限：玉米、饲料……150 ppb
• 交叉反应率：伏马毒素B1……100%
• 样本回收率：饲料……95±15%；玉米……100±15%

3. 试剂盒组成

• 酶标板……96孔
• 标准液（黑盖）：各1 ml（0 ppb、1 ppb、3 ppb、9 ppb、27 ppb、81 ppb）
• 酶标记物（红盖）……55 ml
• 抗体工作液（蓝盖）……55 ml
• 底物液A（白盖）……6 ml
• 底物液B（黑盖）……6 ml
• 终止液（黄盖）……6 ml
• 10×浓缩复溶液（黄盖）……50 ml
• 20×浓缩洗涤液（白盖）……40 ml
• 说明书……1份
• 盖板膜……1张
• 自封袋……1个

4. 所需器材和试剂

• 仪器：酶标仪、打印机、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
• 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl，多道300µl

5. 样本前处理

在处理样本前，实验器具需保持洁净，使用一次性吸头以避免污染。复溶液通过将10×浓缩复溶液用去离子水稀释，并在4℃条件下可保存一个月。工作洗涤液则需20倍稀释。

处理样本：称取1g±0.05g的玉米或饲料样本，加入5 ml去离子水，振荡5分钟后离心。取上清液和复溶液混合后进行分析，样本稀释倍数为50，检测下限为150 ppb。

6. 酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30分钟。编号样本和标准品，并对应微孔。加样后，在每孔加入酶标记物和抗体工作液，封板并轻轻振荡。反应后，进行洗涤及显色操作，然后加入终止液以停止反应，最后在450nm处测定光度值。

7. 结果分析

标准品或样本的百分吸光率计算公式为：百分吸光度值（%）＝A×100%A0，A为样本平均吸光度，A0为0 ppb标准液的吸光度。通过标准曲线读出样本对应浓度，并乘以稀释倍数可得样本中待测物的实际浓度。

8. 注意事项

• 室温低于25℃会导致标准OD值偏低，洗板后应立即进行下一步操作。
• 确保混合均匀、洗涤彻底，以提高ELISA分析的重复性。
• 避免试剂过期和不同批号的交叉使用。
• 终止液具有腐蚀性，操作时需避免接触皮肤。

9. 贮藏及保存期

试剂盒应在2-8℃条件下保存，不可冷冻。有效期为1年，具体生产日期见包装。

使用ag尊龙凯时的伏马毒素B1检测试剂盒，您将能够有效监测食品安全，为人类健康保驾护航。